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以下是關(guān)于嗜酸性粒細(xì)胞染色的相關(guān)內(nèi)容:
瑞氏染色
原理:瑞氏染料由酸性染料伊紅(E-)和堿性染料亞甲藍(lán)(M+)組成。既有物理的吸附作用,又有化學(xué)的親和作用。血紅蛋白、嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì),與酸性染料伊紅結(jié)合,染粉紅色;細(xì)胞核蛋白、淋巴細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞胞質(zhì)為酸性,與堿性染料美藍(lán)或天青結(jié)合,染紫藍(lán)色或藍(lán)色。
操作步驟:首先采血制成血涂片,干燥后做好標(biāo)記,將血涂片平置于染色架上,滴加瑞氏染液 Ⅰ 液 3~5 滴,使其迅速蓋滿血涂片,約 0.5~1min 后,滴加等量或稍多的 Ⅱ 液,輕輕搖動(dòng)玻片或用吸球吹氣,使染液充分混合,5~10min 后用流水沖去染液,待干鏡檢。
吉姆薩染色
原理:吉姆薩染液由天青、伊紅組成,染色原理和結(jié)果與瑞氏染色基本相同。
操作步驟:先按瑞氏染色的方法進(jìn)行采血、推片、干燥、標(biāo)記,然后用甲醇固定 3~5min,再將血涂片置于用磷酸鹽緩沖液(pH6.4~6.8)稀釋 10~20 倍的吉姆薩染液中,浸泡 10~30min,最后取出用流水沖洗,待干鏡檢。
熒光標(biāo)記染色
原理:使用熒光標(biāo)記的抗體或染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,熒光標(biāo)記的抗體或染料會(huì)特異性地與嗜酸性粒細(xì)胞結(jié)合,然后在熒光顯微鏡下觀察,嗜酸性粒細(xì)胞會(huì)呈現(xiàn)出特定的熒光顏色。
操作步驟:一般先將細(xì)胞固定在載玻片上,然后加入熒光標(biāo)記的抗體或染料,孵育一段時(shí)間,使抗體或染料與嗜酸性粒細(xì)胞充分結(jié)合,之后用緩沖液沖洗,去除未結(jié)合的熒光物質(zhì),最后在熒光顯微鏡下觀察。
伊紅 - 亞甲藍(lán)染色
原理:伊紅是酸性染料,亞甲藍(lán)是堿性染料,嗜酸性粒細(xì)胞中的嗜酸性顆粒具有堿性,可與酸性染料伊紅結(jié)合,而細(xì)胞核等成分可與亞甲藍(lán)結(jié)合,從而使嗜酸性粒細(xì)胞呈現(xiàn)出深紫色或深藍(lán)色的顆粒。
操作步驟:將血液涂片或骨髓涂片進(jìn)行固定,然后用伊紅 - 亞甲藍(lán)染液進(jìn)行染色,染色后用流水沖洗,干燥后在顯微鏡下觀察。
2025-11-07
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