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以下是一些常見(jiàn)的凱氏帶染色方法:
實(shí)驗(yàn)材料:植物根組織切片、二甲苯、無(wú)水乙醇、75% 酒精、0.1% 鹽酸小檗堿染色液、0.05% 苯胺藍(lán)染色液、抗熒光淬滅封片液等。
實(shí)驗(yàn)步驟
脫蠟與水化:依次將切片放入二甲苯 Ⅰ20 分鐘、二甲苯 Ⅱ20 分鐘進(jìn)行脫蠟,然后放入無(wú)水乙醇 Ⅰ5 分鐘、無(wú)水乙醇 Ⅱ5 分鐘,最后用 75% 酒精處理 5 分鐘,再用自來(lái)水沖洗。
染色:將切片放入 0.1% 鹽酸小檗堿染色液中避光染色 1 小時(shí),水洗 3-5 次,吸干水分后,將切片置于 0.05% 苯胺藍(lán)染色液中避光染色 30 分鐘,再次水洗 3-5 次,吸干水分。
封片:滴加抗熒光淬滅封片液封片,蓋上蓋玻片。
觀察與拍照:用熒光顯微鏡(DAPI 濾光片)觀察凱氏帶,由于熒光易淬滅,應(yīng)盡快拍照,拍照過(guò)程中注意避光,切片可短暫保存于 4℃環(huán)境下。
實(shí)驗(yàn)材料:植物根組織、堿性品紅染液、固定液(如 FAA 固定液)等。
實(shí)驗(yàn)步驟
取材與固定:選取合適的植物根組織,將其取下后用水沖洗干凈,然后放入 FAA 固定液中固定 24 小時(shí)以上,較大的組織需要切成小塊再固定。
切片:將固定好的根組織進(jìn)行切片,厚度根據(jù)需要確定,一般為 10-20 微米。
染色:將切片放入堿性品紅染液中染色一定時(shí)間,具體時(shí)間根據(jù)材料和染液濃度而定,通常為 1-2 小時(shí)。
漂洗:用蒸餾水或清水漂洗切片,去除多余的染液,直到切片顏色不再明顯變化。
觀察:將染色后的切片放在顯微鏡下觀察,凱氏帶會(huì)被染成紅色,呈現(xiàn)網(wǎng)格狀結(jié)構(gòu),同時(shí)維管組織的木質(zhì)部也會(huì)被染色。
實(shí)驗(yàn)材料:植物根組織切片、間苯三酚溶液、濃鹽酸等。
實(shí)驗(yàn)步驟
準(zhǔn)備切片:將植物根組織切成薄片,可采用徒手切片法或石蠟切片法。
染色:在載玻片上滴加間苯三酚溶液,將切片放入其中浸泡 5-10 分鐘,然后滴加濃鹽酸,立即蓋上蓋玻片。
觀察:在顯微鏡下觀察,凱氏帶中的木質(zhì)素會(huì)被染成紅色或紫紅色,與其他部位形成鮮明對(duì)比。
2025-11-07
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