TTC 染色即 2,3,5 - 氯化三苯基四氮唑染色，以下是關(guān)于它的詳細(xì)介紹：

基本原理：TTC 是一種脂溶性光敏感復(fù)合物，無色且可溶于水?；罴?xì)胞線粒體內(nèi)的琥珀酸脫氫酶等脫氫酶可將 TTC 還原，生成紅色不溶性的三苯甲臜。正常組織中的脫氫酶活性正常，與 TTC 反應(yīng)后呈紅色；而缺血、壞死組織內(nèi)脫氫酶活性下降或喪失，不能與 TTC 反應(yīng)，組織不會(huì)產(chǎn)生顏色變化，仍呈蒼白，從而可通過顏色變化區(qū)分正常組織和受損組織。

染色步驟：

取材：以腦缺血損傷研究為例，可麻醉動(dòng)物后直接取腦或經(jīng)生理鹽水灌注后取腦，取腦時(shí)要保持大腦的完整性。

速凍：將取出的腦組織放入 - 20℃冰箱中速凍 20 分鐘左右，便于后續(xù)切片。

切片：一般切成 5-6 片，每隔 2mm 切一片。第一刀在腦前極與視交叉連線中點(diǎn)處，第二刀在視交叉部位，第三刀在漏斗柄部位，第四刀在漏斗柄與后葉尾極之間。如果需計(jì)算面積，應(yīng)切得均勻或用專門的腦槽。

染色：將切片置于濃度為 1%-2% 的 TTC 溶液中，用錫箔紙蓋住，放入 37℃溫箱 15-30min，并不時(shí)翻動(dòng)腦片，使均勻接觸到染色液。也可以將腦片放入多孔板，再滴入 TTC，覆以圓形蓋玻片使均勻染色。

觀察與分析：染色完成后，可肉眼或在顯微鏡下觀察，紅色區(qū)域?yàn)榇婊罱M織，白色區(qū)域?yàn)閴乃澜M織。還可使用圖像分析軟件如 ImageJ 計(jì)算壞死區(qū)域占比，進(jìn)行定量分析。